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                  精品推薦 I 耐高溫耐抑制劑逆轉錄酶

                  發布時間:2022-10-10 發布人:
                  文字:

                    1970年,Temin 和 Baltimore 從逆轉錄病毒中發現了逆轉錄酶 (RTase),它具有依賴于 RNA 的 DNA 聚合酶 (RDDP),依賴于 DNA 的 DNA 聚合酶 (DDDP) 以及切割 RNA-DNA 異源雙鏈的核糖核酸酶 H(RNase H) 三種活性。

                    幾十年來,RTase 已經成為分子生物學中的一個關鍵工具,RTase 以 mRNA 為模板,由隨機引物、oligo(dT) 或基因特異性引物引導,合成互補的 DNA(complementary DNA,cDNA),再以 cDNA 為模板,可擴增出不含內含子的基因序列。這樣將逆轉錄與 PCR 擴增技術結合,大大推動了分子生物學、遺傳學和醫學領域的發展。

                   

                  | 產品簡介 |

                    M-MLV GIII Reverse Transcriptase 是通過基因修飾和重組技術獲得的第三代 M-MLV 逆轉錄酶。該酶相對于野生型 M-MLV 逆轉錄酶去除了 RNase H 活性,并大幅提高了熱穩定性(最適反應溫度為 50℃),從而大大提高了合成第一鏈 cDNA 時的特異性和長度,增強了對 RNA 復雜二級結構的耐受性。

                   

                  | 產品優勢 |

                  • 高純度,無核酸酶污染,無宿主 DNA 污染

                   

                  • 溫度適應范圍廣,42℃~65℃均可完成逆轉錄反應

                   

                  • 抑制劑耐受性強,對于 Trizol、SDS 等 RNA 提取中易于引入的污染具有更強的耐受能力

                   

                  | 性能展示 |

                  1、無RNA酶污染殘留

                  M-MLV GIII Reverse Transcriptase(BE RTIII)和番茄RNA在37℃下孵育1h,孵育產物進行瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示RNA無明顯變化,即百時美逆轉錄酶產品中無RNase污染。

                   

                  2、42-65℃下高效合成cDNA

                  分別使用百時美(BE)、A公司、B公司的逆轉錄酶,以RNA Marker為底物,在42℃、50℃、55℃、60℃和65℃不同溫度下,按照各品牌推薦的實驗體系,反應30min,逆轉錄產物進行瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示百時美逆轉錄酶在更寬的溫度范圍內有效合成長達9Kb的cDNA產物。

                   

                  3、最快10min即可反應完成

                  分別使用百時美(BE)、A公司、B公司的逆轉錄酶,以RNA Marker為底物,按照各品牌推薦的實驗體系和溫度,分別反應10、20、30min,逆轉錄產物進行瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示百時美逆轉錄酶10min即可有效合成長達9Kb的cDNA產物。

                   

                  4、適應不同表達豐度基因

                  分別使用百時美(BE)、A公司、B公司的逆轉錄酶,以100ng Human RNA為模板,按照各品牌推薦的實驗體系和溫度,并結合qPCR技術測試不同表達豐度基因逆轉錄合成效率。結果顯示不同表達豐度的基因,百時美逆轉酶均能夠有效的逆轉錄合成cDNA產物。

                   

                  5、GIII具有較好的抑制劑耐受性

                  分別使用百時美(BE)、A公司、B公司的逆轉錄酶,以100ng番茄RNA為模板,按照各品牌推薦的實驗體系和溫度,并結合qPCR技術測試在含有Trizol、SDS等抑制劑時不同表達豐度基因逆轉錄合成效率。結果顯示百時美逆轉錄酶對上述抑制劑有較好的耐受性,競品公司的產品均不耐受0.004%SDS。

                   

                   

                  | 應用場景 |

                    可用于 First strand cDNA 合成、Second strand cDNA 合成、RNA primer extension、RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP 和 cDNA 文庫構建等。

                  | 訂購信息 |

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